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摘要：【目的】比較雌、雄海馬對(duì)小鼠抗疲勞和改善記憶障礙的不同作用?！?/span>方法】轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小鼠抗疲勞能 力，將小鼠分3組，1組喂食普通飼料，另外2組分別喂食含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.22%雌、雄海馬的飼料，共喂食6周。 跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)小鼠記憶能力，將小鼠為4組，正常組與乙醇組喂食普通飼料，另外2組分別喂食含有質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.22% 雌、雄海馬的飼料，共喂食6周。體積分?jǐn)?shù)30%乙醇灌胃乙醇組和雌、雄海馬組誘導(dǎo)小鼠記憶損傷模型。【結(jié)果】 抗疲勞實(shí)驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，喂食雄海馬的小鼠在棒時(shí)間顯著延長(zhǎng)（尸<0.05)，其血清中乳酸含量顯著降低（P <0.05);而喂食雌海馬的小鼠在棒時(shí)間和血清乳酸含量均無明顯改變。乙醇記憶損傷實(shí)驗(yàn)中，與對(duì)照組相比，模 型組小鼠跳下平臺(tái)的潛伏期顯著下降（尸<0.01)，錯(cuò)誤數(shù)（次）顯著升高（尸<0.01);與模型組相比，喂食雄海 馬的小鼠跳下平臺(tái)的潛伏期顯著升高（尸<0.05)，錯(cuò)誤數(shù)（次）顯著減少（尸<0.05)，腦組織中的乙酰膽堿酯酶 活性顯著降低（尸<0.05);而喂食雌海馬的小鼠上述指標(biāo)均無改變。【結(jié)論】在增強(qiáng)小鼠抗疲勞能力和改善記憶方 面，雄海馬的功效顯著而雌海馬無效。
關(guān)鍵詞：雌、雄海馬；抗疲勞；gai善記憶
隨著現(xiàn)代生活節(jié)奏的加快，疲勞的產(chǎn)生對(duì)人們 生活質(zhì)量產(chǎn)生了越來越大的影響。延緩疲勞發(fā)生， 迅速消除疲勞，對(duì)人們身體健康極為重要[1]。學(xué)習(xí) 記憶是大腦重要功能之一，也是人類賴以生存和進(jìn) 化的關(guān)鍵。由外力、環(huán)境污染以及酒精等引起的記 憶損傷，特別是因酒精引起的記憶損害越來越多， 會(huì)嚴(yán)重危及人類的正常生活工作，造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)負(fù) 擔(dān)。由于海洋的*環(huán)境，許多海洋藥物具有 的活性和特殊的藥理作用機(jī)制，在抗疲勞和記憶改 善方面的作用日益受到人們的重視[2]。
海馬入藥歷史悠久，藥理作用廣泛，除性激素 樣作用[3-4]外，還具有抗炎[5]、抗氧化、抗疲勞和抗 癌[6]、抗抑郁[7]等作用。三斑海馬能顯著延長(zhǎng)小鼠 負(fù)重游泳時(shí)間，減少運(yùn)動(dòng)過后的乳酸生成并加速乳 酸代謝，其抗疲勞效果優(yōu)于人參[8]。“深海龍”是一 種含有海馬有效成分的水丸，服用后能顯著提高人 體無氧功率、定量負(fù)荷以及極限負(fù)荷工作能力[9]。 藥理研究發(fā)現(xiàn)海馬水、醇提取物能在一定程度上改 善記憶[10]。小鼠妊娠晚期，一次性灌胃谷氨酸單鈉， 可明顯降低60日齡仔鼠Y迷宮學(xué)習(xí)記憶能力[11]。 從三斑海馬中分離出的一種肽類初制劑，可拮抗谷 氨酸單鈉的上述作用[12]。三斑海馬中分離出的一種 小分子多肽能抵抗Ap誘導(dǎo)的神經(jīng)毒性，有望治療 老年癡呆[13]。此外，海馬富含DHA、EPA①-3多不 飽和脂肪酸對(duì)大腦有很好保護(hù)作用的成分[14]。
目前對(duì)《中國(guó)藥典》2015版收錄的5種高藥用 價(jià)值海馬的研究，主要是三斑海馬，但三斑海馬養(yǎng) 殖較為困難，難以滿足市場(chǎng)需求。而線紋海馬因抗 病能力強(qiáng)、存活率高、生長(zhǎng)速率快優(yōu)點(diǎn)[15]，成為近 年來的養(yǎng)殖shou選。同時(shí)線紋海馬較三斑海馬異亮氨 酸、亮氨酸、甲硫氨酸以及精氨酸含量高，這些成 分對(duì)維護(hù)機(jī)體健康，增強(qiáng)免疫力有重要作用[16]。目 前關(guān)于線紋海馬的研究主要集中在抗炎[17]方面，且 傳統(tǒng)中藥習(xí)慣將線紋海馬雌雄配對(duì)入藥[18]，單雄性 或單雌性海馬功效研究尚未見報(bào)道。本研究以單雌 性和單雄性海馬飼喂小鼠，利用轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)和急性乙 醇記憶損傷模型，分析雌、雄海馬對(duì)小鼠增強(qiáng)疲勞 耐受和改善記憶的功效，并通過測(cè)定血清中乳酸 (LA)含量反映小鼠疲勞程度，腦組織中乙酰膽堿 酯酶（AChE)以及乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶（ChAT)活性 反映小鼠與學(xué)習(xí)記憶有關(guān)的膽堿能系統(tǒng)變化，以期 進(jìn)一步闡明線紋海馬功效的機(jī)制，為線紋海馬保健 品和藥品開發(fā)研究提供依據(jù)。
1材料與方法
1.1材料
無特定病原體（SPF級(jí)）六周齡雄性昆明種小 鼠，體質(zhì)量22?24 g，購(gòu)自濟(jì)南朋悅實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育 有限公司（合格證號(hào)：37⑻92⑻008874 )。小鼠飼 養(yǎng)于SPF級(jí)動(dòng)物房，溫度(23±1 )C，濕度(50±10 )%， 12 h光照（7: 00—19:⑻），自由飲食和攝水。小 鼠適應(yīng)環(huán)境7d后開始實(shí)驗(yàn)，此時(shí)小鼠體質(zhì)量均值 為33 g。線紋雌海馬、線紋雄海馬，由深圳市萬騏 海洋生物科技有限公司提供。YLS-4C轉(zhuǎn)棒式疲勞 儀，濟(jì)南益延科技發(fā)展有限公司；XR-3TB跳臺(tái)實(shí) 驗(yàn)系統(tǒng)，上海欣軟信息科技有限公司；高速冷凍臺(tái) 式離心機(jī)，Beckman公司；RT-61⑻酶標(biāo)儀，Rayto
公司。無水乙醇，成都市科龍化工試劑廠。ELISA 試劑盒LA、AChE、ChAT，產(chǎn)品批號(hào)分別為 20170705536T、 20170711258T、 20170702163T，由
江蘇雨桐生物科技有限公司提供。海馬飼料由海馬 粉末與普通粉末飼料按比例混合均勻，混合后的飼 料4C下儲(chǔ)存，小鼠食用飼料每天更新，避免海馬 氧化。
1.2萬法
1.2.1實(shí)驗(yàn)分組海馬抗疲勞實(shí)驗(yàn)共分3組（《 = 15):對(duì)照組飼喂普通飼料，雌海馬組飼喂質(zhì)量分 數(shù)0.22%的雌海馬飼料，雄海馬組飼喂質(zhì)量分?jǐn)?shù) 0.22°%的雄海馬飼料。海馬記憶改善實(shí)驗(yàn)共分4組 (« = 15):對(duì)照組以及乙醇組飼喂普通飼料，雌海 馬組飼喂質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.22%的雌海馬飼料，雄海馬組 飼喂質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.22%的雄海馬飼料。海馬粉末不溶 于水，故采取拌飼料喂食的方式，該方法成熟，應(yīng) 用廣泛[19]。兩個(gè)實(shí)驗(yàn)均喂食海馬飼料6周，記錄初 始體重，之后每周末稱重一次。
1.2.2小鼠轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)[20]先進(jìn)行為期3d的適應(yīng)性 預(yù)實(shí)驗(yàn)，每天將小鼠放置在轉(zhuǎn)棒疲勞儀上，設(shè)置轉(zhuǎn) 棒疲勞儀轉(zhuǎn)速20 r/min，時(shí)間10 min。如有小鼠中 途掉落，則將小鼠放回轉(zhuǎn)棒上繼續(xù)適應(yīng)。正式實(shí)驗(yàn) 中，設(shè)定轉(zhuǎn)速40 r/min，記錄5 min內(nèi)小鼠從開始 到掉棒的時(shí)間。本實(shí)驗(yàn)為一次性測(cè)試結(jié)果。
1.2.3跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)[21]體積分?jǐn)?shù)30%的乙醇以10 mL/kg的劑量在實(shí)驗(yàn)前1 h灌胃乙醇組和雌、雄海 馬組，造成急性乙醇中毒所致記憶損傷造模。跳臺(tái) 實(shí)驗(yàn)時(shí)，將小鼠放置在平臺(tái)上，自由探索試驗(yàn)箱3 min,后將小鼠放置在箱內(nèi)銅柵上，銅柵通電(30 mA 恒流）以刺激小鼠找到平臺(tái)。24 h后正式測(cè)試，記 錄5 mm內(nèi)小鼠次跳下平臺(tái)的時(shí)間，即潛伏期， 以及5 mm內(nèi)小鼠跳下平臺(tái)的總數(shù)（次），即錯(cuò)誤數(shù) (次)。本實(shí)驗(yàn)為一次性測(cè)試結(jié)果。
1.2.4樣品采集轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)結(jié)束30 min后，小鼠斷 頭頸部取血，全血靜置0.5 h，以轉(zhuǎn)速3⑻0 r/min離 心10 min，保存血清于-80 °C冰箱。跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)結(jié)束 24 h后，小鼠斷頭，迅速將全腦剝離，液氮冷凍后 保存于-80 C冰箱。
1.2.5生化指標(biāo)測(cè)定根據(jù)ELISA試劑盒說明書， 測(cè)定抗疲勞實(shí)驗(yàn)小鼠血清LA含量，記憶障礙實(shí)驗(yàn) 小鼠全腦AChE和ChAT活性。
1.2.6數(shù)據(jù)處理所有數(shù)據(jù)均用均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差 (Y盨E)表示，SPSS 19 統(tǒng)計(jì)分析，Graphpad 作
1.2萬法
1.2.1實(shí)驗(yàn)分組海馬抗疲勞實(shí)驗(yàn)共分3組（《 = 15):對(duì)照組飼喂普通飼料，雌海馬組飼喂質(zhì)量分 數(shù)0.22%的雌海馬飼料，雄海馬組飼喂質(zhì)量分?jǐn)?shù) 0.22°%的雄海馬飼料。海馬記憶改善實(shí)驗(yàn)共分4組 (« = 15):對(duì)照組以及乙醇組飼喂普通飼料，雌海 馬組飼喂質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.22%的雌海馬飼料，雄海馬組 飼喂質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.22%的雄海馬飼料。海馬粉末不溶 于水，故采取拌飼料喂食的方式，該方法成熟，應(yīng) 用廣泛[19]。兩個(gè)實(shí)驗(yàn)均喂食海馬飼料6周，記錄初 始體重，之后每周末稱重一次。
1.2.2小鼠轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)[20]先進(jìn)行為期3d的適應(yīng)性 預(yù)實(shí)驗(yàn)，每天將小鼠放置在轉(zhuǎn)棒疲勞儀上，設(shè)置轉(zhuǎn) 棒疲勞儀轉(zhuǎn)速20 r/min，時(shí)間10 min。如有小鼠中 途掉落，則將小鼠放回轉(zhuǎn)棒上繼續(xù)適應(yīng)。正式實(shí)驗(yàn) 中，設(shè)定轉(zhuǎn)速40 r/min，記錄5 min內(nèi)小鼠從開始 到掉棒的時(shí)間。本實(shí)驗(yàn)為一次性測(cè)試結(jié)果。
1.2.3跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)[21]體積分?jǐn)?shù)30%的乙醇以10 mL/kg的劑量在實(shí)驗(yàn)前1 h灌胃乙醇組和雌、雄海 馬組，造成急性乙醇中毒所致記憶損傷造模。跳臺(tái) 實(shí)驗(yàn)時(shí)，將小鼠放置在平臺(tái)上，自由探索試驗(yàn)箱3 min,后將小鼠放置在箱內(nèi)銅柵上，銅柵通電(30 mA 恒流）以刺激小鼠找到平臺(tái)。24 h后正式測(cè)試，記 錄5 mm內(nèi)小鼠次跳下平臺(tái)的時(shí)間，即潛伏期， 以及5 mm內(nèi)小鼠跳下平臺(tái)的總數(shù)（次），即錯(cuò)誤數(shù) (次)。本實(shí)驗(yàn)為一次性測(cè)試結(jié)果。
1.2.4樣品采集轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)結(jié)束30 min后，小鼠斷 頭頸部取血，全血靜置0.5 h，以轉(zhuǎn)速3⑻0 r/min離 心10 min，保存血清于-80 °C冰箱。跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)結(jié)束 24 h后，小鼠斷頭，迅速將全腦剝離，液氮冷凍后 保存于-80 C冰箱。
1.2.5生化指標(biāo)測(cè)定根據(jù)ELISA試劑盒說明書， 測(cè)定抗疲勞實(shí)驗(yàn)小鼠血清LA含量，記憶障礙實(shí)驗(yàn) 小鼠全腦AChE和ChAT活性。
1.2.6數(shù)據(jù)處理所有數(shù)據(jù)均用均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差 (Y盨E)表示，SPSS 19 統(tǒng)計(jì)分析，Graphpad 作
1.2萬法
1.2.1實(shí)驗(yàn)分組海馬抗疲勞實(shí)驗(yàn)共分3組（《 = 15):對(duì)照組飼喂普通飼料，雌海馬組飼喂質(zhì)量分 數(shù)0.22%的雌海馬飼料，雄海馬組飼喂質(zhì)量分?jǐn)?shù) 0.22°%的雄海馬飼料。海馬記憶改善實(shí)驗(yàn)共分4組 (« = 15):對(duì)照組以及乙醇組飼喂普通飼料，雌海 馬組飼喂質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.22%的雌海馬飼料，雄海馬組 飼喂質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.22%的雄海馬飼料。海馬粉末不溶 于水，故采取拌飼料喂食的方式，該方法成熟，應(yīng) 用廣泛[19]。兩個(gè)實(shí)驗(yàn)均喂食海馬飼料6周，記錄初 始體重，之后每周末稱重一次。
1.2.2小鼠轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)[20]先進(jìn)行為期3d的適應(yīng)性 預(yù)實(shí)驗(yàn)，每天將小鼠放置在轉(zhuǎn)棒疲勞儀上，設(shè)置轉(zhuǎn) 棒疲勞儀轉(zhuǎn)速20 r/min，時(shí)間10 min。如有小鼠中 途掉落，則將小鼠放回轉(zhuǎn)棒上繼續(xù)適應(yīng)。正式實(shí)驗(yàn) 中，設(shè)定轉(zhuǎn)速40 r/min，記錄5 min內(nèi)小鼠從開始 到掉棒的時(shí)間。本實(shí)驗(yàn)為一次性測(cè)試結(jié)果。
1.2.3跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)[21]體積分?jǐn)?shù)30%的乙醇以10 mL/kg的劑量在實(shí)驗(yàn)前1 h灌胃乙醇組和雌、雄海 馬組，造成急性乙醇中毒所致記憶損傷造模。跳臺(tái) 實(shí)驗(yàn)時(shí)，將小鼠放置在平臺(tái)上，自由探索試驗(yàn)箱3 min,后將小鼠放置在箱內(nèi)銅柵上，銅柵通電(30 mA 恒流）以刺激小鼠找到平臺(tái)。24 h后正式測(cè)試，記 錄5 mm內(nèi)小鼠次跳下平臺(tái)的時(shí)間，即潛伏期， 以及5 mm內(nèi)小鼠跳下平臺(tái)的總數(shù)（次），即錯(cuò)誤數(shù) (次)。本實(shí)驗(yàn)為一次性測(cè)試結(jié)果。
1.2.4樣品采集轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)結(jié)束30 min后，小鼠斷 頭頸部取血，全血靜置0.5 h，以轉(zhuǎn)速3⑻0 r/min離 心10 min，保存血清于-80 °C冰箱。跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)結(jié)束 24 h后，小鼠斷頭，迅速將全腦剝離，液氮冷凍后 保存于-80 C冰箱。
1.2.5生化指標(biāo)測(cè)定根據(jù)ELISA試劑盒說明書， 測(cè)定抗疲勞實(shí)驗(yàn)小鼠血清LA含量，記憶障礙實(shí)驗(yàn) 小鼠全腦AChE和ChAT活性。
1.2.6數(shù)據(jù)處理所有數(shù)據(jù)均用均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差 (Y盨E)表示，SPSS 19 統(tǒng)計(jì)分析，Graphpad 作
圖。參數(shù)數(shù)據(jù)均采用單因素方差分析，進(jìn)行LSD檢 驗(yàn)，非參數(shù)數(shù)據(jù)（跳臺(tái)潛伏期和抗疲勞行為實(shí)驗(yàn)） 均米用 Kruskal-Wallis 分析，進(jìn)行 Wilcoxon- Mann-Whitney U-test檢驗(yàn)。所有檢測(cè)指標(biāo)《 = 15。
2實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.1雌、雄海馬對(duì)小鼠體質(zhì)量影響
圖1可知，實(shí)驗(yàn)前，各組小鼠體質(zhì)量沒有差異 (P>0.05)。飼養(yǎng)6周后，各組小鼠的體質(zhì)量均有 增加，但與對(duì)照組相比，飼喂雌、雄海馬的小鼠體 質(zhì)量均無顯著差異（戶>0.05)，說明雌、雄海馬對(duì) 小鼠的正常生長(zhǎng)并無影響。
2.2雌、雄海馬飼喂對(duì)小鼠抗疲勞耐受時(shí)間影響
小鼠從開始到掉棒的持續(xù)時(shí)間越長(zhǎng)，表示小鼠 耐受時(shí)間越長(zhǎng)，抗疲勞能力越強(qiáng)。圖2顯示，與對(duì) 照組相比，雌海馬組的耐受時(shí)間無顯著差異（戶> 0.05 )，雄海馬組的耐受時(shí)間則顯著升高（丑 =7.353, P<0.05 )，說明僅雄海馬能增強(qiáng)小鼠抗疲勞能力。
2.3雌、雄海馬飼喂對(duì)小鼠血清中乳酸LA影響
圖3顯示，雄海馬對(duì)血清乳酸水平有顯著效果 (F(2,42)=3.465, P<0.05)。與對(duì)照組相比，雌海 馬組的血清LA水平無顯著差異（P>0.05 )，雄海 馬組的血清LA水平則顯著降低（P<0.05 );與雌 海馬組相比，雄海馬組的血清LA水平也顯著降低 (P<0.05)結(jié)果表明雄海馬能有效降低運(yùn)動(dòng)疲勞 后小鼠體內(nèi)LA含量。
2.4雌、雄海馬對(duì)小鼠跳臺(tái)潛伏期和錯(cuò)誤數(shù)（次） 影響
圖4顯示，雄海馬對(duì)乙醇誘導(dǎo)的跳臺(tái)潛伏期有 顯著改善效果（萬=29.364, P<0.01)。與對(duì)照組相 比，乙醇組的潛伏期顯著降低（P<0.01);與乙醇 組相比，雌海馬組的潛伏期無明顯升高（P>0.05)， 雄海馬組的潛伏期則顯著升高(P<0.01 )。表明30% 乙醇灌胃能造成小鼠記憶損傷，雄海馬能顯著改善 這種記憶障礙，而雌海馬無效。
4雌、雄海馬對(duì)小鼠跳臺(tái)潛伏期的影響 Effect of female and male sea horse on step-down latency in mice
圖5顯示，海馬對(duì)乙醇誘導(dǎo)的跳臺(tái)錯(cuò)誤數(shù)（次) 有顯著改善效果（F(3,56)=12.315, P<0.01)。與對(duì) 照組相比，乙醇組的錯(cuò)誤數(shù)（次）顯著升高（P< 0.01 );與乙醇組相比，雌、雄海馬組的錯(cuò)誤數(shù)（次) 均顯著降低（P<0.05)。表明對(duì)于乙醇造成的記憶 損傷，雌、雄海馬能部分進(jìn)行改善。
**, VS 對(duì)照組 P<0.01; #, VS 乙醇組 P<0.05
**, VS control group P<0.01; #, VS female sea horse group P<0.05
圖5雌、雄海馬對(duì)小鼠跳臺(tái)錯(cuò)誤數(shù)（次）的影口向
Fig. 5 Effect of female and male sea horse on the number of
errors in step-down test in mice
2.5雌、雄海馬對(duì)小鼠腦內(nèi)乙酰膽堿酯酶AChE和 乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶ChAT活性影響
圖6顯示，海馬對(duì)乙醇誘導(dǎo)的AChE活性有顯 著改善效果（F(3,56)=13.5 3 5, P<0.05)。與對(duì)照組 相比，乙醇組AChE活性顯著升高（P<0.01);與 乙醇組相比，雄海馬組AChE活性顯著降低（P< 0.05)。結(jié)果表明，乙醇能導(dǎo)致小鼠腦內(nèi)AChE活性 上升，雄海馬能逆轉(zhuǎn)這一影響
圖6雌、雄海馬對(duì)小鼠腦內(nèi)乙酰膽堿酯酶活性的影響
Fig. 6 Effect of female and male sea horse on the brain
activity of AChE in mice
圖7顯示，與對(duì)照組相比，乙醇誘導(dǎo)使得腦內(nèi) ChAT 活性顯著降低（F(3,56) =5.656,尸<0.05);但 是與乙醇組相比，雌、雄海馬兩個(gè)組ChAT活性均 沒有變化（尸>0.05)。結(jié)果表明，乙醇造成的記憶 損傷會(huì)使腦內(nèi)ChAT活性下降，但是雌、雄海馬對(duì) 這一變化并無改善作用。
3討論
運(yùn)動(dòng)耐力是反映機(jī)體疲勞直jie客觀的指標(biāo)， 運(yùn)動(dòng)耐力的增強(qiáng)是抗疲勞能力增強(qiáng)的有力表現(xiàn)。 小鼠轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn)是一種強(qiáng)迫全身消耗性實(shí)驗(yàn)，其運(yùn)動(dòng) 時(shí)間的長(zhǎng)短是衡量疲勞的一個(gè)指標(biāo)[22]。乳酸是機(jī)體 在無氧條件下進(jìn)行糖代謝的終產(chǎn)物，劇烈運(yùn)動(dòng)時(shí)機(jī) 體會(huì)產(chǎn)生大量乳酸，乳酸的積累會(huì)導(dǎo)致機(jī)體疲勞， 可反映機(jī)體疲勞程度[23]。在本研究中，雄海馬表現(xiàn) 出對(duì)血乳酸的清除作用，提高了機(jī)體對(duì)氧的利用能 力，降低了無氧酵解程度，從而延長(zhǎng)了小鼠運(yùn)動(dòng)耐 受時(shí)間。彭汶鐸等[24]也發(fā)現(xiàn)小鼠連續(xù)14 d灌胃海馬 酶解提取物，在一次性運(yùn)動(dòng)和遞增運(yùn)動(dòng)量疲勞模型 中，小鼠血清中乳酸含量均顯著降低。但是飼喂雌 海馬的小鼠，其耐受時(shí)間與血清乳酸含量與對(duì)照組 相比，并無明顯變化，證明單獨(dú)的雌海馬不能改善 小鼠的運(yùn)動(dòng)機(jī)能，沒有抗疲勞作用。
跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)是檢測(cè)動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶能力的常用方 法，跳臺(tái)潛伏期和錯(cuò)誤數(shù)（次）是評(píng)價(jià)動(dòng)物學(xué)習(xí)記 憶的重要指標(biāo)。潛伏期長(zhǎng)，錯(cuò)誤數(shù)（次）少，表明 動(dòng)物的學(xué)習(xí)記憶能力強(qiáng)。本研究中，30°%乙醇灌胃 對(duì)小鼠的學(xué)習(xí)記憶能力造成了損傷。一次性飲人過量乙醇，能引起中樞神經(jīng)系統(tǒng)由興奮轉(zhuǎn)為抑制狀 態(tài)，首先作用于大腦皮層，然后累及皮層下中樞和 小腦，導(dǎo)致記憶力下降[25]。乙醇對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的 損傷機(jī)制比較復(fù)雜，其中之一是對(duì)膽堿能系統(tǒng)的影 響[26]。而中樞膽堿能系統(tǒng)則與學(xué)習(xí)記憶密相關(guān)，膽 堿能系統(tǒng)的重要神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿（ACh)，其釋放 量隨著學(xué)習(xí)與記憶、探究行為等認(rèn)知活動(dòng)的發(fā)生而 隨之改變。ChAT對(duì)ACh的合成起著催化作用，而 AChE則參與腦內(nèi)ACh的分解，使神經(jīng)遞質(zhì)對(duì)突觸 后膜的興奮作用終止，保證神經(jīng)傳遞正常。在大腦 內(nèi)，ChAT和AChE共同維持著ACh的動(dòng)態(tài)平衡[27]。 由于ACh性質(zhì)極不穩(wěn)定，容易水解，故通過檢測(cè) ChAT和AChE的活性間接來反映ACh的含量。從 實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，乙醇組ChAT活性降低，AChE活 性升高，即ACh分解加快而合成減少，AChE總體 水平降低，學(xué)習(xí)記憶受損。從行為上看，飼喂雄海 馬的小鼠其學(xué)習(xí)記憶有所改善，潛伏期增加，錯(cuò)誤 數(shù)（次）減少；而飼喂雌海馬的小鼠，學(xué)習(xí)記憶能 力并未改善。生化指標(biāo)則顯示，飼喂雄海馬的小鼠 其腦內(nèi)AChE活性與乙醇組相比顯著降低，ChAT 活性則無明顯變化，提示雄海馬對(duì)學(xué)習(xí)記憶的改善 可能是通過抑制ACh分解而非加速其合成，此外在 不同記憶損傷模型小鼠中，利用不同中藥如夏天無 和刺五加，均顯示可通過抑制AChE來達(dá)到記憶改 善的效果[28-29];由于雌海馬未能改善乙醇造成的學(xué) 習(xí)記憶損傷，所以與乙醇組相比，飼喂雌海馬的小 鼠其腦內(nèi)ChAT和AChE活性也無改變。
本研究存在以下兩點(diǎn)不足：1.評(píng)價(jià)抗疲勞經(jīng)典 藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)有轉(zhuǎn)棒疲勞和負(fù)重游泳，評(píng)價(jià)記憶改善 的有跳臺(tái)，避暗及水迷宮實(shí)驗(yàn)。目前本實(shí)驗(yàn)只各米 用了其中一種方法。2.實(shí)驗(yàn)中所用海馬為粉末粗材 料，應(yīng)該找出其中的有效成分進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。接下來筆 者及研究團(tuán)隊(duì)將對(duì)雌、雄海馬成分進(jìn)行更深人的分 析，優(yōu)化海馬提取物，完善實(shí)驗(yàn)方案，為更準(zhǔn)確、 更好地利用海馬資源提供理論依據(jù)。
4結(jié)論
雄海馬可以通過降低體內(nèi)乳酸含量，增強(qiáng)小鼠 的抗疲勞能力；通過抑制乙酰膽堿酯酶，改善小鼠 的學(xué)習(xí)記憶能力；而單獨(dú)的雌海馬則沒有上述功 能。雄海馬在抗疲勞和改善記憶方面的*而 雌海馬無效。
