進(jìn)行條件性恐懼實(shí)驗(yàn)要注意哪些事項(xiàng)
點(diǎn)擊次數(shù)：756 更新時(shí)間：2022-07-20
條件性恐懼實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)（也叫場(chǎng)景恐懼系統(tǒng)）用于小型嚙齒類動(dòng)物（大、小鼠）環(huán)境相關(guān)條件性恐懼實(shí)驗(yàn)研究。嚙齒類動(dòng)物在恐懼時(shí)會(huì)表現(xiàn)出*的不動(dòng)狀態(tài)（Freezing），動(dòng)物在這種情況下傾向于保持靜止不動(dòng)的防御姿勢(shì)?？挂钟羲幒涂怪袠信d奮藥可以明顯縮短不動(dòng)狀態(tài)持續(xù)的時(shí)間。實(shí)驗(yàn)過程中，實(shí)驗(yàn)對(duì)象被給與一個(gè)聲音信號(hào)（條件刺激），隨后給予電擊（非條件）刺激。該訓(xùn)練稱為條件性訓(xùn)練，訓(xùn)練結(jié)束后實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行聲音信號(hào)或環(huán)境聯(lián)系性實(shí)驗(yàn)。一般情況下嚙齒類動(dòng)物對(duì)相應(yīng)的環(huán)境和不同環(huán)境下同樣的聲音信號(hào)都會(huì)做出明顯的條件性恐懼反應(yīng)，如靜止不動(dòng)。這種測(cè)試可以在訓(xùn)練結(jié)束后立刻或幾天后進(jìn)行可以提供在條件信號(hào)影響下短期和長(zhǎng)期記憶的信息。
1.動(dòng)物對(duì)電擊的反應(yīng)部分地取決于非條件刺激的電擊強(qiáng)度和痛苦。當(dāng)動(dòng)物(尤其是基因改變的動(dòng)物，如轉(zhuǎn)基因或基因敲除小鼠)不能學(xué)會(huì)關(guān)聯(lián)條件反射時(shí)，可能是電擊強(qiáng)度不夠或痛苦偏高所致。對(duì)條件反應(yīng)程度與電擊強(qiáng)度進(jìn)行比較分析，可排除對(duì)電擊強(qiáng)度因素的疑慮;對(duì)刺激電流強(qiáng)度(0.1^0.7mA)與反應(yīng)作一“量-效曲線”，可評(píng)價(jià)動(dòng)物的痛苦或?qū)﹄姄舻拿舾行浴４送?，格柵地板若沾有?dòng)物的排泄物也可改變電刺激強(qiáng)度。因此，應(yīng)保持格柵地板的清潔與干燥。
2.由于老年動(dòng)物聽力減弱甚至喪失，對(duì)聽覺暗示可能反應(yīng)遲鈍或無反應(yīng)。此外，有些品系的小鼠，即使在成年早期，對(duì)高頻音刺激的反應(yīng)尤其減弱。因此，用這一模型測(cè)定.老年動(dòng)物或某些品系的小鼠時(shí)應(yīng)特別謹(jǐn)慎，并避免用高頻音刺激。
3.要使動(dòng)物在關(guān)聯(lián)測(cè)試中表現(xiàn)凝滯行為，必須讓其在操作箱內(nèi)有適當(dāng)?shù)臅r(shí)間。應(yīng)避免將動(dòng)物放入箱內(nèi)便立即給予電刺激，因?yàn)檫@樣動(dòng)物沒有時(shí)間在電擊與箱內(nèi)環(huán)境(關(guān)聯(lián))之間形成聯(lián)系。
4.觀察者必須快速、準(zhǔn)確地判定動(dòng)物是否表現(xiàn)凝滯行為，而不應(yīng)在整個(gè)10s觀察期間死盯著動(dòng)物，以免動(dòng)物在這10s間隙活動(dòng)而導(dǎo)致計(jì)分不準(zhǔn)。不同觀察者應(yīng)用同一種方法計(jì)分，兩名觀察者計(jì)分之間的相關(guān)系數(shù)應(yīng)在0.98以上。同樣地，當(dāng)采用自動(dòng)計(jì)分系統(tǒng)進(jìn)行計(jì)分時(shí)，應(yīng)對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行調(diào)節(jié)，使之與人工方法計(jì)分相比，兩者的相關(guān)系數(shù)在0.98~~1之間。
5.在本實(shí)驗(yàn)中，先測(cè)試關(guān)聯(lián)學(xué)習(xí)，再測(cè)試暗示條件反應(yīng)。在關(guān)聯(lián)測(cè)試中沒有聽覺暗示刺激，因此,動(dòng)物在暗示條件測(cè)試時(shí)對(duì)聽覺刺激的反應(yīng)有可能發(fā)生消退(extinction)。理論上，這種聽覺暗示反應(yīng)可能減弱。為消除這種實(shí)驗(yàn)偏差，將其中一半動(dòng)物先測(cè)試聽覺暗示反應(yīng)，一小時(shí)后再檢查關(guān)聯(lián)條件反應(yīng)。
6.實(shí)驗(yàn)分兩天進(jìn)行。訓(xùn)練和測(cè)試應(yīng)在每天的同一時(shí)間進(jìn)行。測(cè)試(凝滯計(jì)分)所花的時(shí)間比訓(xùn)練要長(zhǎng)的多，因此，同--批訓(xùn)練的動(dòng)物不宜過多。
7.暗示和關(guān)聯(lián)兩種條件恐懼可表現(xiàn)出發(fā)育差異和基因差異。例如，年齡在18天的大鼠有聽覺條件恐懼，但極少有關(guān)聯(lián)條件恐懼;而到23天時(shí)，關(guān)聯(lián)和聽覺暗示條件恐懼都有。有些品系的小鼠(如DBA/2小鼠)只有很弱的關(guān)聯(lián)條件恐懼，但聽覺條件恐懼卻很好。
8.對(duì)有些基因型動(dòng)物，如果預(yù)先讓其短暫適應(yīng)關(guān)聯(lián)條件，關(guān)聯(lián)學(xué)習(xí)會(huì)得到改善。一般認(rèn)為這與海馬功能增強(qiáng)有關(guān)。這種適應(yīng)通常在訓(xùn)練前一天進(jìn)行，而且時(shí)間很短(30^60s)。
9.暗示條件恐懼由側(cè)杏仁核調(diào)節(jié)，而關(guān)聯(lián)條件恐懼由杏仁核和海馬共同介導(dǎo)。毀損這些腦區(qū)可削弱或阻斷暗示與關(guān)聯(lián)恐懼條件反射。
